ELISA實驗前期準(zhǔn)備工作之樣本收集方法

點擊次數(shù)：17763 發(fā)布時間：2016/4/29 14:03:58

上海極威生物科技有限公司專業(yè)生產(chǎn)各類elisa試劑盒，標(biāo)準(zhǔn)品，細(xì)胞株等科研試劑，技術(shù)部陳技術(shù)此次為大家解說ELISA實驗前期準(zhǔn)備工作：樣本的具體收集方法：

ELISA實驗過程中，一般用來實驗檢測的樣本類型包括血液（指血，靜脈血），尿液，糞便提取物，腦脊液，胸腹水，前列腺液，精液，陰道分泌物等，這些樣本收集的時間及方法和保存都各不一樣，都有一定的要求。下面來分別介紹下每個類型樣本的收集方法：

一、elisa血液樣本的采集：血液樣本分為外周血和靜脈血

采集血液樣本前，有些生理因素，如吸煙、進食、運動、情緒波動、妊娠、體位等均可影響血液中某些成分的變化，有些甚至還有晝夜變化。因此血液標(biāo)本的采集應(yīng)盡量避免生理因素干擾，以條件一致為宜，如若無法避免，應(yīng)在標(biāo)本上注明該因素。

1．外周血的采集

外周血的采集通常取左手無名指內(nèi)側(cè)采血，該部位應(yīng)無凍瘡，炎癥，水腫，破損。如該部位不符合要求，以其他手指部位代替。對于燒傷病人的采集，可選擇皮膚完整處采血。由于部分血液常規(guī)檢測（如白細(xì)胞計數(shù)、分類等）受生理因素影響波動過大，比較時宜使條件盡量一致。涉及到體內(nèi)出、凝血功能的檢測項目（如血小板計數(shù)，出血時間或凝血時間等）的檢測，一定要注意了解患者是否用過抗凝、促凝藥物，以便在減少或避免干擾因素的影響。

2．靜脈血

靜脈血的采集除涉及各種止血和血栓檢測等項目需采用抗凝靜脈血血漿外，目前絕大多數(shù)檢測項目的分析檢測可直接采用靜脈血的血清。在血清檢測項目中，有些（如血糖，血脂等）受飲食及晝夜因素影響較大，一般以清晨空腹血標(biāo)本為宜；有些在血中衰變較快（血清酶活性測定如ACP活性等），0~4℃貯存活性減弱也不一，這些項目的檢測必須及時而快速；有些（如肌酸激酶等）受運動等因素影響較大。抽血時避免溶血的發(fā)生也十分重要，尤其涉及血鉀，LDH等的測定。

二、elisa尿液樣本的采集方法

尿液樣本的采集同血標(biāo)本一樣，尿液標(biāo)本受飲食、運動、藥物量等因素的影響也較大，其主要的特別是飲食的影響，故一般來說晨尿優(yōu)于隨機尿。晨尿是指清晨起床后的次尿標(biāo)本，較濃縮和酸化，有形成分（如血細(xì)胞，上皮細(xì)胞，管形）相對集中便于觀察。隨機尿即隨意一次尿，留取方便，但受飲食、運動、藥物影響較甚，易于出現(xiàn)假陽性和假陰性結(jié)果，如飲食性蛋白尿，飲食性糖尿，維生素C干擾潛血結(jié)果等。餐后尿（午餐后2小時收集的患者尿液）適用于尿糖，尿蛋白和尿膽原的檢查，此時的尿標(biāo)本可增加試驗敏感性，檢出較輕微的病變。12小時尿細(xì)胞計數(shù)即Addis計數(shù)（前晚8時排空膀胱后留取至次日晨8時的所有尿液），因時間較長，細(xì)菌易繁殖，須加入防腐劑甲醛。24小時尿（天晨8時排空膀胱后留取至次日晨8時的所有尿液）中化學(xué)物質(zhì)的定量，包括蛋白，糖，尿17-酮、17-羥類固醇，兒茶酚胺，Ca2+等，檢測不同的物質(zhì)，選擇不同的防腐劑防腐。清潔中段尿多用于尿細(xì)菌培養(yǎng)，要求無菌，沖洗外陰后留取標(biāo)本。所有尿標(biāo)本的收集都應(yīng)足量，*少12 ml，50 ml，定時尿須全部收集，對女性患者應(yīng)避免陰道分泌物、經(jīng)血污染尿標(biāo)本。

三、elisa糞便樣本的采集方法

糞便標(biāo)本的檢測對判斷消化系統(tǒng)疾病有重要參考價值。采集時要求用干凈的竹簽選取含有粘液、膿血等異常病變成分的糞便，對外觀無異常的糞便須從表面、深處及糞端多處取材。找寄生蟲蟲體及作蟲卵計數(shù)應(yīng)收集24小時糞便。查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體應(yīng)于排便后立即檢查，從有膿血和稀軟處取材，保溫送檢。查日本血吸蟲蟲卵時應(yīng)取粘液、膿血部分，孵化毛蚴時至少留取30g糞便，且需盡快處理。檢查蟯蟲卵須用透明薄膜拭子于晚12時或清晨排便前自肛門周圍皺襞處拭取并立即鏡檢。隱血試驗（化學(xué)法），試驗前3日禁食肉類及含動物血食物并禁服鐵劑，維生素C等。所有糞便標(biāo)本采集后1小時內(nèi)應(yīng)檢查完畢，以防止有形成分受消化酶及pH的破壞。

四、腦脊液樣本的采集

腦脊液標(biāo)本采集后立即送檢，放置過久將影響檢驗結(jié)果：如細(xì)胞變性，破壞，導(dǎo)致計數(shù)和分類不準(zhǔn)；有些化學(xué)物質(zhì)如葡萄糖等將分解含量減少；細(xì)菌發(fā)生自溶影響細(xì)菌的檢出率。腦脊液抽取后一般分裝三個無菌管，管作細(xì)菌培養(yǎng)，第二管作化學(xué)分析和免疫學(xué)檢查，第三管作一般性狀及顯微鏡檢查，三管的順序不宜顛倒。因標(biāo)本采集較難，全部送檢和檢測過程應(yīng)注意安全。

五、胸腹水樣本的采集

與腦脊液標(biāo)本一樣，采集后的標(biāo)本注意安全，及時送檢。一般也分裝三管，一管作常規(guī)細(xì)胞學(xué)檢查，一管生化檢查，一管細(xì)菌培養(yǎng)，順序以與腦脊液相同為宜。

六、前列腺液樣本的采集

前列腺液標(biāo)本由前列腺按摩后采集，液量少時直接滴在載玻片上及時送檢，須注意防止標(biāo)本蒸干，量多時收集在潔凈干燥的試管中。若按摩不出前列腺液，可檢查按摩后的尿液沉渣。

七、精液樣本的采集

精液標(biāo)本采集前應(yīng)禁欲3~7天，排凈尿液后可用手淫法或其他方法將精液直接排入干凈的容器中，保溫并及時送檢。由于精子生成日間變動較大，一般應(yīng)檢查2~3次（每次間隔1~2周）方可做診斷。

八、陰道分泌物樣本的采集

陰道標(biāo)本采集前24小時應(yīng)禁止房事、盆浴、陰道檢查、陰道灌洗及局部上藥等，取材所用器械需清潔。一般用鹽水浸濕的棉拭子自陰道深部或陰道穹后部、宮頸管口等處取材，制成生理鹽水涂片后觀察陰道分泌物標(biāo)本，經(jīng)期的女性患者不宜檢查陰道分泌物標(biāo)本。

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