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點(diǎn)擊次數(shù)：17727 發(fā)布時(shí)間：2016/5/9 10:51:16
大家都知道，實(shí)驗(yàn)前，我們在收集樣本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃，首先必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。然后對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)的樣本，及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?/span>（注：對(duì)于隔天再檢測(cè)的樣本，及時(shí)分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆�，有條件的，-70℃凍存?zhèn)溆�。�?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融） 下面我們分別對(duì)不同的樣本的處理做一個(gè)簡(jiǎn)單的說(shuō)明： 一、關(guān)于液體類標(biāo)本:液體類標(biāo)本包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。 1. 血清： 室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。 2. 血漿： 應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。 3. 尿液： 用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。 4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清： 檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。 二、培養(yǎng)細(xì)胞 檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。 三、組織標(biāo)本 切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆�。�?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。 上海極威生物科技有限公司專業(yè)供應(yīng)各類ELISA試劑盒，種類齊全，質(zhì)量保障，售后完善，歡迎廣大科研學(xué)者前來(lái)選購(gòu)！
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