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點(diǎn)擊次數(shù)：18919 發(fā)布時(shí)間：2016/5/17 8:21:45
五月初，清華大學(xué)的楊老師在我司購(gòu)買了3個(gè)elisa試劑盒，前段時(shí)間，楊老師反饋ELISA背景深，全部呈有色，問是什么原因？希望能得到技術(shù)老師的解答。我司陳技術(shù)有著6年的ELISA酶聯(lián)免疫法的操作經(jīng)驗(yàn)，有著豐富的實(shí)驗(yàn)經(jīng)歷，為楊老師解答了心中的疑問，深受楊老師的贊揚(yáng)！就楊老師的問題，我司陳技術(shù)做了以下分析：
ELISA實(shí)驗(yàn)中，背景深，全部呈有色（通常的Elisa背景值OD<0.2）
根據(jù)陳技術(shù)的分析，可能存在的原因有以下幾條：
1、ELISA實(shí)驗(yàn)可能原因：實(shí)驗(yàn)過程中洗滌不充分，洗后未拍干，樣品中其它成分殘留或酶標(biāo)記物殘留；
解決辦法：洗液準(zhǔn)確配制；充分洗滌，靜置15秒，徹底拍干。加樣或加酶拍板的濾紙應(yīng)棄去不用，不要反復(fù)使用，否則易造成污染。
2、ELISA實(shí)驗(yàn)可能原因之二：底物污染，未避光保存，出現(xiàn)顏色；
解決辦法：棄去底物，重新配置
3、ELISA實(shí)驗(yàn)可能原因之三：樣品稀釋液污染；
解決辦法：棄去稀釋液，重新配置
4、ELISA實(shí)驗(yàn)可能原因之四：吸頭重復(fù)使用，未洗凈或消毒不徹底；
解決辦法：吸頭盡可能一次性使用
5、ELISA實(shí)驗(yàn)可能原因之五：不正確的孵育時(shí)間，溫度（尤其是底物孵育的時(shí)間）；
解決辦法：*為常用的溫育溫度有37℃和室溫，其次是43℃和2～8℃。完全按照說明書要求
6、ELISA實(shí)驗(yàn)可能原因之六：偶聯(lián)抗體（streptavidin-HRP）濃度過高；
解決辦法：按照說明書調(diào)整到*佳的濃度
7、ELISA實(shí)驗(yàn)可能原因之七：板子不正確的貯存；
解決辦法：酶標(biāo)板貯存于2-8 ℃；使用結(jié)合力低點(diǎn)的Elisa板
8、ELISA實(shí)驗(yàn)可能原因之八：沒有正確封閉；
解決辦法：在標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液中加入動(dòng)物蛋白或延長(zhǎng)封閉時(shí)間
9、ELISA實(shí)驗(yàn)可能原因之九：樣本溶血嚴(yán)重；
解決辦法：建議使用非溶血或輕微溶血樣本，嚴(yán)重溶血樣本會(huì)導(dǎo)致背景偏高。
一般上海情況下，ELISA實(shí)驗(yàn)中，背景深，全部呈有色的原因都一一列出來(lái)了！陳技術(shù)的表現(xiàn)讓楊老師很滿意！這次試驗(yàn)完成后，準(zhǔn)備下次再訂購(gòu)2盒。
上海極威生物科技有限公司是一家專業(yè)生產(chǎn)各類ELISA試劑盒，標(biāo)準(zhǔn)品，細(xì)胞及相關(guān)生物試劑的生物公司，公司產(chǎn)品豐富，種類齊全，價(jià)格實(shí)惠，售后完善！歡迎廣大科研學(xué)者前來(lái)選購(gòu)！
原創(chuàng)作者：上海極威生物科技有限公司
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