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通用型細(xì)胞核形態(tài)染色/細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒
主要用途
通用型細(xì)胞核形態(tài)染色/細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)熒光染料與DNA特異性結(jié)合，呈現(xiàn)藍(lán)色，用于分析和觀(guān)察細(xì)胞核形態(tài)或DNA含量的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞核（動(dòng)物、人體、植物、昆蟲(chóng)等）的觀(guān)察�？梢员挥糜诩�(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞流式儀分析等研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，熒光清晰，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。
技術(shù)背景
赫斯特染料（Hoechst 33258）為特異性 DNA 活性染料，與 A-T 鍵結(jié)合，這種染料對(duì)死細(xì)胞或固著細(xì)胞可立即染色。而活細(xì)胞的著色是漸進(jìn)性的，在 10 分鐘內(nèi)可達(dá)飽和。在熒光顯微鏡下，活細(xì)胞核呈彌散均勻熒光，出現(xiàn)細(xì)胞凋亡時(shí)，細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可見(jiàn)濃染致密的顆粒塊狀熒光。在紫外光激發(fā)下，呈現(xiàn)明亮的藍(lán)色熒光。
產(chǎn)品內(nèi)容
清理液（Reagent A） 毫升
反應(yīng)液（Reagent B） 毫升
染色液（Reagent C） 微升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份
保存方式
保存染色液（Reagent C）在－20℃冰箱里，用鋁箔封裹，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里，有效bao證6月
用戶(hù)自備
胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液（G&VS12024）：用于細(xì)胞脫離
wan全細(xì)胞培養(yǎng)液（G&VS12052）：用于中和胰蛋白酶的處理
15毫升錐形離心管：用于細(xì)胞收集的容器
1.5毫升離心管：用于細(xì)胞染色的容器
微型臺(tái)式離心機(jī)：用于細(xì)胞收集的操作
倒置熒光顯微鏡：用于觀(guān)察細(xì)胞核形態(tài)
細(xì)胞流式儀：用于細(xì)胞熒光分析
實(shí)驗(yàn)步驟
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，從－20℃冰箱里取出染色液（Reagent C），置入冰槽里融化。移出xx微升反應(yīng)液（Reagent B）和xx微升染色液（Reagent C）到新的1.5毫升離心管，混勻后標(biāo)記為染色工作液。然后進(jìn)行下列操作。
一、 直接法
1． 準(zhǔn)備1個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)12孔板的待測(cè)細(xì)胞，每孔鋪滿(mǎn)率達(dá)70％（約30萬(wàn)細(xì)胞數(shù)）
2． 小心抽去細(xì)胞培養(yǎng)液
3． 輕輕沿著孔壁加入xx毫升 清理液（Reagent A）到細(xì)胞培養(yǎng)孔，覆蓋培養(yǎng)孔表面
4． 小心抽去xx毫升 清理液（Reagent A）
5． 加入xx微升含有反應(yīng)液（Reagent B）和染色液（Reagent C）的染色工作液， 覆蓋培養(yǎng)孔表面
6． 在暗室里室溫下孵育2分鐘
7． 即刻在倒置熒光顯微鏡下進(jìn)行觀(guān)察：紫外波長(zhǎng)350nm（細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色）
二、間接法
1． 準(zhǔn)備1個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)12孔板的待測(cè)細(xì)胞，每孔鋪滿(mǎn)率達(dá)70％（約30萬(wàn)細(xì)胞數(shù)）
2． 小心移出細(xì)胞培養(yǎng)液到15毫升錐形離心管（收集懸浮細(xì)胞）
3． 加入xx毫升 清理液（Reagent A）到細(xì)胞培養(yǎng)孔，覆蓋培養(yǎng)孔表面
4． 小心移出xx毫升 清理液（Reagent A）到15毫升錐形離心管（收集洗脫細(xì)胞）
5． 加入500微升用戶(hù)自備的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液，鋪滿(mǎn)整個(gè)培養(yǎng)孔表面
6． 放進(jìn)37℃培養(yǎng)箱孵育1分種
7． 輕輕手擊震動(dòng)培養(yǎng)板，使細(xì)胞脫落
8． 加入1毫升用戶(hù)自備的wan全細(xì)胞培養(yǎng)液
9． 移入15毫升錐形離心管
10． 放進(jìn)臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘，速度為300g
11． 小心抽去上清液
12． 加入xx微升清理液（Reagent A）
13． 用200微升槍頭上下輕柔抽吸，混勻細(xì)胞顆粒群
14． 轉(zhuǎn)入到1.5毫升離心管或細(xì)胞流式儀專(zhuān)用測(cè)試管
15． 加入xx微升含有反應(yīng)液（Reagent B）和染色液（Reagent C）的染色工作液
16． 輕度渦旋震蕩2秒
17． 在暗室里室溫下孵育2分鐘
18． 即刻移取50微升在載玻片上壓片，
19． 在倒置熒光顯微鏡下進(jìn)行觀(guān)察：紫外波長(zhǎng)350nm（細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色）
20． 或即刻進(jìn)行細(xì)胞流式儀分析：紫外波長(zhǎng)350nm，觀(guān)察50000個(gè)細(xì)胞以上
注意事項(xiàng)
1． 本產(chǎn)品為100次（8個(gè)12孔細(xì)胞培養(yǎng)板）操作
2． 所有操作均須無(wú)菌狀態(tài)下進(jìn)行
3． 確保實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性，須收集所有懸浮和貼壁細(xì)胞；同時(shí)要確保足夠的細(xì)胞數(shù)
4． 可用35mm培養(yǎng)皿、6孔培養(yǎng)板或25cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶操作，相應(yīng)增加染色液的用量。但12孔培養(yǎng)板為理想選擇
5． 操作時(shí)，須戴手套
6． 孵育時(shí)，須避免光照
7． 建議細(xì)胞染色完成后，即刻進(jìn)行分析；若暫不觀(guān)察，可保存在4℃冰箱里，但不宜超過(guò)1周
8． 細(xì)胞核呈現(xiàn)多個(gè)散在塊狀結(jié)構(gòu)，為細(xì)胞凋亡
9． 細(xì)胞流式儀分析前，須混勻內(nèi)容物
10． 細(xì)胞流式儀分析，細(xì)胞檢測(cè)量不得少于10000個(gè)
11． 告知流式儀技術(shù)員有關(guān)細(xì)胞類(lèi)型
12． 本公司提供系列細(xì)胞核染色分析試劑產(chǎn)品
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
1． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光清晰
使用cheng諾
極威生物秉著“信譽(yù)至上、客戶(hù)滿(mǎn)意、質(zhì)量cheng諾”的宗旨為我們的用戶(hù)提供you質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù)。用戶(hù)收到貨后，應(yīng)按照產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)上的規(guī)定妥善保管并在有效期內(nèi)使用。我們的產(chǎn)品在銷(xiāo)售前已作嚴(yán)格的質(zhì)量鑒定，bao證說(shuō)明書(shū)所述的使用效果。在貨到后10天內(nèi)若發(fā)現(xiàn)確屬本產(chǎn)品的質(zhì)量問(wèn)題，請(qǐng)立即以書(shū)面形式（實(shí)驗(yàn)報(bào)告）與本公司聯(lián)系，并將該產(chǎn)品退回，經(jīng)檢驗(yàn)確系產(chǎn)品質(zhì)量所致，本公司負(fù)責(zé)更換產(chǎn)品。如系使用者錯(cuò)誤操作所致，本公司不承擔(dān)由此造成的損失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
訂購(gòu)信息
單組分訂購(gòu)信息
編號(hào) 名稱(chēng) 規(guī)格
G&VS10023.1 通用型細(xì)胞核形態(tài)/細(xì)胞凋亡檢測(cè)染色試劑盒 100次
G&VS10023.1A 清理液（Reagent A） 毫升
G&VS10023.1B 反應(yīng)液（Reagent B） 毫升
G&VS10023.1C 染色液（Reagent C） 毫升
G&VS12024 胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液 毫升
G&VS12052 DMEM完quan細(xì)胞培養(yǎng)基 毫升
試劑盒訂購(gòu)信息
| 產(chǎn)品編號(hào) | 名稱(chēng) | 規(guī)格 |
| G&VS10023.1 | 通用型細(xì)胞核形態(tài)染色/細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒 | 100次 |
| G&VS10023.2 | PROPIDIUM IODIDE細(xì)胞核形態(tài)染色/細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒 | 100次 |
| G&VS10023.3 | CHROMOMYCIN A3細(xì)胞核形態(tài)染色/細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒 | 50次 |
| G&VS10023.4 | 吖啶橙（acridine orange）細(xì)胞凋亡染色試劑盒 | 50次 |
| G&VS10092.1 | HOECHST 33342和PROPIDIUM IODIDE細(xì)胞膜變檢測(cè)試劑盒 | 50次 |
| G&VS10092.2 | 吖啶橙（acridine orange）和溴化乙錠（ethidine bromide）雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒 | 50次 |
| G&VS10092.3 | 吖啶橙（Acridine Orange）/赫斯特33342（HOECHST33342）雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒 | 50次 |
| G&VS10092.4 | 吖啶橙（Acridine Orange）/碘化丙啶（PROPIDIUM IODIDE）雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒 | 50次 |
原創(chuàng)作者：上海極威生物科技有限公司
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