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點擊次數(shù):16967 發(fā)布時間:2022/4/25 14:56:26
ELISA 檢測試劑盒#人巨噬細胞刺激蛋白 α(MSP-α)ELISA 檢測試劑盒的詳細說明書@技術(shù)發(fā)布
據(jù)技術(shù)部4月25日13時52分透露:(http://www.app17.com/c110001/products/d11347341.html)
試劑盒組成
洗板方法
1. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置 1min 后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板 5 次。
2. 自動洗板機:每孔注入洗液 350μL,浸泡 1min,洗板 5 次。
名稱 | 96 孔配置 | 48 孔配置 | 備注 |
微孔酶標板 | 12 孔×8 條 | 12 孔×4 條 | 無 |
標準品 | 0.3mL | 0.3mL | 無 |
樣本稀釋液 | 6mL | 3mL | 無 |
檢測抗體-HRP | 10mL | 5mL | 無 |
20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說明書進行稀釋 |
底物 A | 6mL | 3mL | 無 |
底物 B | 6mL | 3mL | 無 |
終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
封板膜 | 2 張 | 2 張 | 無 |
說明書 | 1 份 | 1 份 | 無 |
自封袋 | 1 個 | 1 個 | 無 |
操作步驟
1. 從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回 4℃。
2. 設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品 50μL;
3. 待測樣本孔先加待測樣本 10μL,再加樣本稀釋液 40μL;
4. 隨后標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記
注:標準品濃度依次為:1600、800、400、200、100、0 pg/mL.
的檢測抗體 100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫
試劑的準備
育 60min。
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按 1:20 稀釋,即 1 份的 20×洗滌
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置 1min,甩去
緩沖液加 19 份的蒸餾水。
洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板 5 次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。
7. 每孔加入終止液 50μL,15min 內(nèi),在 450nm 波長處測定各孔的OD 值。
結(jié)果判斷
繪制標準曲線:在 Excel 工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應(yīng)OD 值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。
試劑盒性能
1. 準確性:標準品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù) R 值,大于等于0.9900。
2. 靈敏度:**低檢測濃度小于 10 pg/mL。
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于 10%、板間變異系數(shù)小于 15%。
5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6 個月免責(zé)聲明
1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所產(chǎn)生的一切后果,由實驗者承擔(dān),本公司概不負責(zé)。
2. 嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔(dān)。
原創(chuàng)作者:上海極威生物科技有限公司
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