聯(lián) 系 人：段煜
電 話：15214379366
手 機：16602115336
地 址：上海市崇明縣長興鎮(zhèn)潘園公路1800號2號樓9703室（上海泰和經(jīng)濟發(fā)展區(qū)）
郵 編：201913
傳 真：021-80186165
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價格：電議 型號：
原產(chǎn)地：中國大陸發(fā)布時間：2022/4/8 13:11:04
采購度：152
本公司4月8日13時09分報道：
檢測原理
試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被人結(jié)腸癌抗原（CCA）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人結(jié)腸癌抗原（CCA）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于
-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。自備物品
1. 酶標(biāo)儀（450nm）
2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱操作注意事項
1. 試劑盒保存在 2-8℃，使用前室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶，這屬于正�，F(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。
2. 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。
3. 預(yù)處理后的樣本無需稀釋，直接取 10μL 加樣即可。
4. 嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
試劑盒組成
洗板方法
1. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置 1min 后甩盡
孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板 5 次。
| 名稱 | 96 孔配置 | 48 孔配置 | 備注 |
| 微孔酶標(biāo)板 | 12 孔×8 條 | 12 孔×4 條 | 無 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.3mL | 0.3mL | 無 |
| 樣本稀釋液 | 6mL | 3mL | 無 |
| 檢測抗體-HRP | 10mL | 5mL | 無 |
| 20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說明書進行稀釋 |
| 底物 A | 6mL | 3mL | 無 |
| 底物 B | 6mL | 3mL | 無 |
| 終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
| 封板膜 | 2 張 | 2 張 | 無 |
| 說明書 | 1 份 | 1 份 | 無 |
| 自封袋 | 1 個 | 1 個 | 無 |
2. 自動洗板機：每孔注入洗液 350μL，浸泡 1min，洗板 5 次。操作步驟
1. 從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回 4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品 50μL；
3. 待測樣本孔先加待測樣本 10μL，再加樣本稀釋液 40μL；
注：標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為：2400、1200、600、300、150、0 pg/mL.
4. 隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記
試劑的準(zhǔn)備
的檢測抗體 100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫
20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按 1：20 稀釋，即 1 份的 20×洗滌
育 60min。
緩沖液加 19 份的蒸餾水。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置 1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板 5 次（也可用洗板機洗板）。
6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。
7. 每孔加入終止液 50μL，15min 內(nèi)，在 450nm 波長處測定各孔的OD 值。
結(jié)果判斷
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：在 Excel 工作表中，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo)，對應(yīng)OD 值作縱坐標(biāo)，繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。
試劑盒性能
1. 準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù) R 值，大于等于0.9900。
2. 靈敏度：檢測濃度小于 10 pg/mL。
3. 特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)小于 10%、板間變異系數(shù)小于 15%。
5. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。
6. 有效期：6 個月免責(zé)聲明
1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實驗者承擔(dān)，本公司概不負責(zé)。
2. 嚴(yán)格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔(dān)。
更新時間：2024/5/24 11:45:35
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