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為什么實驗過程中孵育、洗滌需要振蕩?如何振蕩?振蕩孵育使反應(yīng)更充分,振蕩洗滌使背景更干凈。建議使用酶標(biāo)專用96孔微孔板振蕩器。孵育過程振蕩,可以加快、加強抗原抗體間的相互碰撞接觸,使得反應(yīng)過程更加完全,OD值通常會比未振蕩孵育的結(jié)果要高;洗滌過程振蕩,可以使洗板更干凈,在很大程度上能降低背景值,同時可以提高試劑盒檢測的靈敏度。何時終止ELISA反應(yīng)?ELISA實驗*終需要酶催化底物顯色反應(yīng)來完成,在時間終止反應(yīng)是ELISA實驗成功的重要因素。在HRP-TMB酶反應(yīng)系統(tǒng)中,當(dāng)濃度標(biāo)準(zhǔn)品顏色不再變深,倒數(shù)2-3個濃度標(biāo)準(zhǔn)品顏色開始有淺藍(lán)色時,便需要終止反應(yīng);或者也可以根據(jù)濃度標(biāo)準(zhǔn)品孔在620nm的OD值來決定,OD620=0.9-0.95之間時即可終止。
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更新時間:2024/5/24 11:46:26
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