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· 上 傳 者： 上海極威生物科技有限公司
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· 所屬分類：法規(guī)標(biāo)準(zhǔn)
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· 資料簡介： 本試劑盒只能用于科學(xué)研究，不得用于醫(yī)學(xué)診斷 雞傳染性支氣管炎病毒（IBV）ELISA檢測試劑盒 使用說明書 檢測原理 試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被雞傳染性支氣管炎病毒（IBV）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的雞傳染性支氣管炎病毒（IBV）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），判斷樣品是否含有雞傳染性支氣管炎病毒（IBV）。 樣品收集、處理及保存方法 1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。 5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 自備物品 1. 酶標(biāo)儀（450nm） 2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 3. 37℃恒溫箱 操作注意事項(xiàng) 1. 試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶，這屬于正常現(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。 2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。 3. 預(yù)處理后的樣本無需稀釋，直接取10μL加樣即可。 4. 嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。 5. 所有液體組分使用前充分搖勻。 試劑盒組成 名稱 96孔配置 48孔配置 備注 微孔酶標(biāo)板 96孔 48孔 無 陰性對照 0.3mL 0.3mL 無 陽性對照 0.3mL 0.3mL 無 樣本稀釋液 6mL 3mL 無 檢測抗體-HRP 10mL 5mL 無 20×洗滌緩沖液 25mL 15mL 按說明書進(jìn)行稀釋 底物A 6mL 3mL 無 底物B 6mL 3mL 無 終止液 6mL 3mL 無 封板膜 2張 2張 無 說明書 1份 1份 無 自封袋 1個 1個 無 試劑的準(zhǔn)備 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。 洗板方法 1. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。 2. 自動洗板機(jī)：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。 操作步驟 1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。 2. 設(shè)置陰、陽性對照孔和樣本孔，陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照各50μL； 3. 待測樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL； 4. 隨后陰、陽性對照孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗原100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。 5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。 6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。 7. 每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。 尊敬的客戶： 您好！上海極威生物科技有限公司（Shanghai JIwei Biological Technology Co., Ltd.）成立于上海，是一家專業(yè)從事“產(chǎn)品研發(fā)、市場銷售、技術(shù)服務(wù)”為一體的高科技生物技術(shù)公司。極威生物依托國內(nèi)外技術(shù)研發(fā)人才的優(yōu)勢，由留美資深科學(xué)家與數(shù)位國內(nèi)多年從事生物領(lǐng)域研究的博士、碩士等高校生物領(lǐng)域研究人員共同創(chuàng)立，在科學(xué)研究和醫(yī)療檢測領(lǐng)域享有極高的聲譽(yù)，經(jīng)過多年的努力發(fā)展已成為專業(yè)供應(yīng)各類生物科研用品的公司，長期專注于生物領(lǐng)域，旗下產(chǎn)品種類眾多。極威生物秉承以產(chǎn)品質(zhì)量為根本，以市場需求為導(dǎo)向，以為客戶創(chuàng)造價值為己任的精神，致力于發(fā)展中國的科研事業(yè)。力求為我國生物科技事業(yè)提供更好的、更專業(yè)性的技術(shù)服務(wù)和科研產(chǎn)品。自公司成立以來，公司的銷售額保持高速增長，企業(yè)規(guī)模不斷擴(kuò)大，研發(fā)產(chǎn)品包括elisa試劑盒，生化試劑盒，動物血制品，抗體，標(biāo)準(zhǔn)品，生化試劑，實(shí)驗(yàn)耗材等10萬余種類，公司長期致力于elisa試劑盒、生化試劑盒的研發(fā)，為客戶提供生化試劑盒、ELISA試劑盒、技術(shù)服務(wù)等一系列實(shí)驗(yàn)代測服務(wù)。 實(shí)驗(yàn)代做服務(wù)：酶聯(lián)免疫ELISA、生化測試、液相氣相檢測、Icp-MS測試、載體構(gòu)建、RACE、全基因合成、線粒體測序、熒光定量PCR、基因克隆、定點(diǎn)突變、染色體步移、基因組全序列獲取、環(huán)境微生物多樣性、微生物基因組測序、微生物菌種鑒定、甲基化分析服務(wù)等,公司本著“質(zhì)量，專業(yè)服務(wù)”的原則，致力于為用戶提供高性價比的試劑盒和檢測服務(wù)。
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